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RNAu
La expresión de sustancias que resultan tóxicas es la causa de muchas enfermedades. Así, las infecciones virales, muchas enfermedades hereditarias e incluso el cáncer se producen por la expresión en las células de genes virales, dominantes negativos u oncogenes, respectivamente. Por ello es esencial aplicar tecnología que permita la inhibición específica de la expresión génica. Inhibiendo específicamente la expresión del gen tóxico y manteniendo constante la expresión del resto de los genes celulares, podríamos impedir el desarrollo de muchas enfermedades sin efectos secundarios.
Recientemente se ha desarrollado con éxito creciente una técnica de inhibición basada en la interferencia de RNA (RNAi). En el laboratorio nosotros hemos desarrollado una tecnología similar que denominamos RNAu o uso de snRNP U1 modificados. La técnica consiste en introducir en la célula genes similares a los que codifican para el snRNA U1, un RNA pequeño y abundante en la célula donde controla la expresión génica. Cuando el snRNA U1 se une a una diana de RNA determinada cerca de su extremo final, impide que esta se produzca adecuadamente y, con ello, impide su expresión por un mecanismo molecular bien caracterizado. Cuando nosotros introducimos en la célula un snRNA U1 modificado para que se una al RNA de un gen tóxico, este inhibe su formación y con ello la expresión del gen.
Generalmente, las inhibiciones obtenidas con RNAu son mayores que las que se observan con RNAi y se potencian cuando se utilizan varios RNAu distintos contra el mismo gen. Con esta técnica se inhibe eficazmente la expresión de genes endógenos en células en cultivo tanto de forma estable como transitoria, indicando que la técnica es eficaz y no resulta tóxica para la célula. Actualmente estamos estudiando el mecanismo de inhibición en modelos de ratón y estamos evaluando su especificidad.
Además, estamos utilizando esta técnica para desarrollar inhibidores del virus de la Hepatitis B.
La imagen muestra la inhibición de la expresión de luciferasa comparada con la obtenida en ratones control. El gen de la luciferasa en los ratones inhibidos contiene secuencias que interaccionan con el snRNA U1 endógeno y, por ello, se inhibe su expresión. La actividad luciferasa se ha captado en una cámara luminométrica.
